Nature.com ની મુલાકાત લેવા બદલ આભાર.તમે જે બ્રાઉઝર સંસ્કરણનો ઉપયોગ કરી રહ્યાં છો તે મર્યાદિત CSS સપોર્ટ ધરાવે છે.શ્રેષ્ઠ અનુભવ માટે, અમે ભલામણ કરીએ છીએ કે તમે અપડેટ કરેલ બ્રાઉઝરનો ઉપયોગ કરો (અથવા Internet Explorer માં સુસંગતતા મોડને અક્ષમ કરો).આ દરમિયાન, સતત સમર્થન સુનિશ્ચિત કરવા માટે, અમે શૈલીઓ અને JavaScript વિના સાઇટને રેન્ડર કરીશું.
ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી એ ઇન્ટ્રાસેલ્યુલર પ્રોટોઝોઆન પરોપજીવી છે જે ચેપગ્રસ્ત યજમાનના સૂક્ષ્મ વાતાવરણને મોડ્યુલેટ કરે છે અને મગજની ગાંઠની વૃદ્ધિની ઘટનાઓ સાથે સંકળાયેલ હોવાનું જાણીતું છે.આ અભ્યાસમાં, અમે અનુમાન કરીએ છીએ કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપથી એક્ઝોસોમલ miRNA-21 મગજની ગાંઠની વૃદ્ધિને પ્રોત્સાહન આપે છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત BV2 માઇક્રોગ્લિયાના એક્ઝોસોમ્સ લાક્ષણિકતા હતા અને U87 ગ્લિઓમા કોષોના આંતરિકકરણની પુષ્ટિ કરવામાં આવી હતી.એક્સોસોમલ માઇક્રોઆરએનએ અભિવ્યક્તિ પ્રોફાઇલ્સનું ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી અને ટ્યુમર સૉર્ટિંગ સાથે સંકળાયેલ માઇક્રોઆરએનએ અને માઇક્રોઆરએનએ-21A-5p ના એરેનો ઉપયોગ કરીને વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.અમે એક્ઝોસોમ્સમાં miR-21 સ્તરોને બદલીને U87 ગ્લિઓમા કોષોમાં ટ્યુમર-સંબંધિત જનીનોના mRNA સ્તરોની અને માનવ U87 ગ્લિઓમા સેલ પ્રસાર પર એક્સોસોમની અસરની પણ તપાસ કરી.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડીથી ચેપગ્રસ્ત U87 ગ્લિઓમા કોષોના એક્ઝોસોમમાં, માઇક્રોઆરએનએ-21 ની અભિવ્યક્તિ વધે છે અને એન્ટિટ્યુમર જનીનો (ફોક્સઓ1, પીટીએન અને પીડીસીડી4) ની પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો થાય છે.ટોક્સોપ્લાઝ્માથી સંક્રમિત BV2-પ્રાપ્ત એક્સોસોમ U87 ગ્લિઓમા કોષોના પ્રસારને પ્રેરિત કરે છે.એક્ઝોસોમ્સ માઉસ ટ્યુમર મોડેલમાં U87 કોષોના વિકાસને પ્રેરિત કરે છે.અમે સૂચવીએ છીએ કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત BV2 માઈક્રોગ્લિયામાં એક્સોસોમલ miR-21 નો વધારો એન્ટિટ્યુમર જનીનોને ડાઉન રેગ્યુલેટ કરીને U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં સેલ વૃદ્ધિ પ્રમોટર તરીકે મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવી શકે છે.
એવો અંદાજ છે કે 2018 માં વિશ્વભરમાં અદ્યતન કેન્સરના 18.1 મિલિયનથી વધુ કેસોનું નિદાન થયું હતું, જેમાં દર વર્ષે લગભગ 297,000 સેન્ટ્રલ નર્વસ સિસ્ટમ ટ્યુમરનું નિદાન થયું હતું (તમામ ગાંઠોના 1.6%)1.અગાઉના સંશોધનો દર્શાવે છે કે માનવ મગજની ગાંઠો વિકસાવવા માટેના જોખમી પરિબળોમાં વિવિધ રાસાયણિક ઉત્પાદનો, પારિવારિક ઇતિહાસ અને માથાના રોગનિવારક અને નિદાન સાધનોમાંથી આયનાઇઝિંગ રેડિયેશનનો સમાવેશ થાય છે.જો કે, આ જીવલેણ રોગોનું ચોક્કસ કારણ અજ્ઞાત છે.વિશ્વભરમાં લગભગ 20% કેન્સર ચેપી એજન્ટો દ્વારા થાય છે, જેમાં વાયરસ, બેક્ટેરિયા અને પરોપજીવીઓ 3,4 સામેલ છે.ચેપી પેથોજેન્સ યજમાન કોષની આનુવંશિક પદ્ધતિઓ, જેમ કે ડીએનએ રિપેર અને કોષ ચક્રને વિક્ષેપિત કરે છે, અને ક્રોનિક બળતરા અને રોગપ્રતિકારક તંત્રને નુકસાન પહોંચાડે છે5.
માનવ કેન્સર સાથે સંકળાયેલ ચેપી એજન્ટો સૌથી સામાન્ય વાયરલ પેથોજેન્સ છે, જેમાં માનવ પેપિલોમાવાયરસ અને હેપેટાઇટિસ બી અને સી વાયરસનો સમાવેશ થાય છે.માનવ કેન્સરના વિકાસમાં પરોપજીવીઓ પણ સંભવિત ભૂમિકા ભજવી શકે છે.શિસ્ટોસોમા, ઓપીશોર્ચિસ વિવેરીની, ઓ. ફેલિનિયસ, ક્લોનોર્કિસ સિનેન્સિસ અને હાયમેનોલેપિસ નાના નામની કેટલીક પરોપજીવી પ્રજાતિઓ માનવ કેન્સર 6,7,8ના વિવિધ પ્રકારોમાં ફસાયેલી છે.
ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી એ એક અંતઃકોશિક પ્રોટોઝોઆન છે જે ચેપગ્રસ્ત યજમાન કોષોના સૂક્ષ્મ વાતાવરણને નિયંત્રિત કરે છે.આ પરોપજીવી વિશ્વની લગભગ 30% વસ્તીને સંક્રમિત કરવાનો અંદાજ છે, જે સમગ્ર વસ્તીને 9,10 જોખમમાં મૂકે છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી સેન્ટ્રલ નર્વસ સિસ્ટમ (CNS) સહિતના મહત્વપૂર્ણ અવયવોને સંક્રમિત કરી શકે છે અને ઘાતક મેનિન્જાઇટિસ અને એન્સેફાલીટીસ જેવી ગંભીર બીમારીઓનું કારણ બને છે, ખાસ કરીને રોગપ્રતિકારક શક્તિ ધરાવતા દર્દીઓમાં.જો કે, ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી રોગપ્રતિકારક શક્તિ ધરાવતા વ્યક્તિઓમાં કોષની વૃદ્ધિ અને રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓને મોડ્યુલેટ કરીને ચેપગ્રસ્ત યજમાનના પર્યાવરણને પણ બદલી શકે છે, જે એસિમ્પટમેટિક ક્રોનિક ચેપ 9,11ની જાળવણી તરફ દોરી જાય છે.રસપ્રદ વાત એ છે કે, T. gondii વ્યાપ અને મગજની ગાંઠની ઘટનાઓ વચ્ચેના સહસંબંધને જોતાં, કેટલાક અહેવાલો સૂચવે છે કે ક્રોનિક T. gondii ચેપને કારણે વિવો હોસ્ટ પર્યાવરણીય ફેરફારો ટ્યુમર માઇક્રોએનવાયરમેન્ટને મળતા આવે છે.
એક્ઝોસોમ્સ ઇન્ટરસેલ્યુલર કોમ્યુનિકેટર્સ તરીકે ઓળખાય છે જે પડોશી કોષોમાંથી પ્રોટીન અને ન્યુક્લિક એસિડ સહિત જૈવિક સામગ્રી પહોંચાડે છે16,17.એક્સોસોમ્સ ગાંઠ-સંબંધિત જૈવિક પ્રક્રિયાઓને પ્રભાવિત કરી શકે છે જેમ કે એન્ટિ-એપોપ્ટોસીસ, એન્જીયોજેનેસિસ અને ગાંઠના સૂક્ષ્મ વાતાવરણમાં મેટાસ્ટેસિસ.ખાસ કરીને, miRNAs (miRNAs), નાના નોન-કોડિંગ RNAs લગભગ 22 ન્યુક્લિયોટાઇડ્સ લંબાઈમાં, મહત્વપૂર્ણ પોસ્ટ-ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ જીન રેગ્યુલેટર છે જે miRNA-પ્રેરિત સાયલન્સિંગ કોમ્પ્લેક્સ (miRISC) દ્વારા માનવ mRNA ના 30% થી વધુને નિયંત્રિત કરે છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી ચેપગ્રસ્ત યજમાનોમાં miRNA અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરીને જૈવિક પ્રક્રિયાઓને વિક્ષેપિત કરી શકે છે.યજમાન miRNAs પરોપજીવીની અસ્તિત્વ વ્યૂહરચના હાંસલ કરવા માટે યજમાન જૈવિક પ્રક્રિયાઓનું નિયમન કરવા માટે મહત્વપૂર્ણ સંકેતો ધરાવે છે.આમ, T. gondii ના ચેપ પછી યજમાન miRNA પ્રોફાઇલમાં ફેરફારોનો અભ્યાસ કરવાથી અમને યજમાન અને T. ગોન્ડી વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને વધુ સ્પષ્ટ રીતે સમજવામાં મદદ મળી શકે છે.ખરેખર, થિરુગ્નાનમ એટ અલ.15 એ સૂચવ્યું કે T. gondii ગાંઠ વૃદ્ધિ સાથે સંકળાયેલ ચોક્કસ યજમાન miRNAs પર તેની અભિવ્યક્તિ બદલીને મગજના કાર્સિનોજેનેસિસને પ્રોત્સાહન આપે છે અને જાણવા મળ્યું કે T. gondii પ્રાયોગિક પ્રાણીઓમાં ગ્લિઓમાસનું કારણ બની શકે છે.
આ અભ્યાસ ટોક્સોપ્લાઝ્મા BV2 થી સંક્રમિત યજમાન માઇક્રોગ્લિયામાં એક્સોસોમલ miR-21 ના ​​ફેરફાર પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરે છે.અમે FoxO1/p27 ના ન્યુક્લિયસમાં જાળવી રાખવાને કારણે U87 ગ્લિઓમા કોષોના વિકાસમાં બદલાયેલ એક્ઝોસોમલ miR-21 ની સંભવિત ભૂમિકાનું અવલોકન કર્યું, જે ઓવરએક્સપ્રેસ્ડ miR-21નું લક્ષ્ય છે.
BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સ ડિફરન્સિયલ સેન્ટ્રીફ્યુગેશનનો ઉપયોગ કરીને મેળવવામાં આવ્યા હતા અને સેલ્યુલર ઘટકો અથવા અન્ય વેસિકલ્સ સાથેના દૂષણને રોકવા માટે વિવિધ પદ્ધતિઓ દ્વારા માન્ય કરવામાં આવ્યા હતા.SDS-polyacrylamide જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ (SDS-PAGE) એ BV2 કોશિકાઓ અને એક્ઝોસોમ્સ (આકૃતિ 1A) માંથી કાઢવામાં આવેલા પ્રોટીન વચ્ચેની અલગ પેટર્ન દર્શાવી હતી અને એલિક્સની હાજરી માટે નમૂનાઓનું મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું, જેનું વિશ્લેષણ માં એક્સોસોમલ પ્રોટીન માર્કર્સના પશ્ચિમી બ્લોટિંગ દ્વારા કરવામાં આવ્યું હતું.એલિક્સ લેબલીંગ એક્ઝોસોમ પ્રોટીનમાં જોવા મળ્યું હતું પરંતુ BV2 સેલ લાયસેટ પ્રોટીન (ફિગ. 1B) માં નથી.વધુમાં, BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સમાંથી શુદ્ધ RNAનું બાયોએનાલાઈઝરનો ઉપયોગ કરીને વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.18S અને 28S રિબોસોમલ સબ્યુનિટ્સ એક્ઝોસોમલ RNA સ્થળાંતર પેટર્નમાં ભાગ્યે જ જોવા મળ્યા હતા, જે વિશ્વસનીય શુદ્ધતા (આકૃતિ 1C) દર્શાવે છે.છેલ્લે, ટ્રાન્સમિશન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપીએ દર્શાવ્યું હતું કે અવલોકન કરાયેલ એક્ઝોસોમ્સ લગભગ 60-150 nm કદના હતા અને તેમાં એક્ઝોસોમ મોર્ફોલોજી (ફિગ. 1D) ની લાક્ષણિકતા કપ જેવી રચના હતી.
BV2 કોષોમાંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમનું લક્ષણ.(A) સલામતી ડેટા શીટ પૃષ્ઠ.BV2 કોષો અથવા BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમમાંથી પ્રોટીનને અલગ કરવામાં આવ્યા હતા.પ્રોટીન પેટર્ન કોષો અને એક્ઝોસોમ વચ્ચે અલગ પડે છે.(બી) એક્ઝોસોમલ માર્કર (એલિક્સ)નું પશ્ચિમી બ્લોટ વિશ્લેષણ.(C) બાયોએનાલાઈઝરનો ઉપયોગ કરીને BV2 કોષો અને BV2 મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સમાંથી શુદ્ધ RNAનું મૂલ્યાંકન.આમ, BV2 કોષોમાં 18S અને 28S રિબોસોમલ સબ્યુનિટ્સ એક્સોસોમલ આરએનએમાં ભાગ્યે જ જોવા મળ્યા હતા.(D) ટ્રાન્સમિશન ઈલેક્ટ્રોન માઈક્રોસ્કોપી દર્શાવે છે કે BV2 કોષોમાંથી અલગ કરાયેલા એક્ઝોસોમ 2% યુરેનાઈલ એસીટેટથી નકારાત્મક રીતે ડાઘવાળા હતા.એક્ઝોસોમ્સ આશરે 60-150 nm કદના અને કપ આકારના હોય છે (સોંગ અને જંગ, અપ્રકાશિત ડેટા).
કોન્ફોકલ માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરીને U87 માનવ ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમનું સેલ્યુલર આંતરિકકરણ જોવા મળ્યું હતું.PKH26 લેબલવાળા એક્ઝોસોમ U87 કોષોના સાયટોપ્લાઝમમાં સ્થાનીકૃત છે.ન્યુક્લી પર DAPI (ફિગ. 2A) થી ડાઘા પડ્યા હતા, જે દર્શાવે છે કે BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમ યજમાન કોષો દ્વારા આંતરિક બનાવી શકાય છે અને પ્રાપ્તકર્તા કોષોના પર્યાવરણને પ્રભાવિત કરી શકે છે.
U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમનું આંતરિકકરણ અને ટોક્સોપ્લાઝ્મા RH પ્રેરિત U87 ગ્લિઓમા કોષોના પ્રસારથી ચેપગ્રસ્ત BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ્સ.(A) કોન્ફોકલ માઈક્રોસ્કોપી દ્વારા માપવામાં આવેલા U87 કોષો દ્વારા ઘેરાયેલા એક્ઝોસોમ્સ.U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓ PKH26 (લાલ) સાથે લેબલવાળા એક્ઝોસોમ સાથે અથવા 24 કલાક માટે નિયંત્રણ વિના ઉકાળવામાં આવ્યા હતા.ન્યુક્લિયસને DAPI (વાદળી) થી રંગવામાં આવ્યા હતા અને પછી કોન્ફોકલ માઇક્રોસ્કોપ (સ્કેલ બાર: 10 μm, x 3000) હેઠળ અવલોકન કરવામાં આવ્યું હતું.(B) U87 ગ્લિઓમા સેલ પ્રસાર કોષ પ્રસાર પરખ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું.U87 ગ્લિઓમા કોષોને દર્શાવેલ સમય માટે એક્સોસોમ્સ સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P < 0,05 получено по t-критерию Стьюдента. *વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટ દ્વારા P < 0.05. *P < 0.05 通过学生t 检验获得. *P < 0.05 * P < 0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * P < 0.05 વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને મેળવેલ.
U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમના આંતરિકકરણની પુષ્ટિ કર્યા પછી, અમે માનવ ગ્લિઓમા કોષોના વિકાસમાં BV2-પ્રાપ્ત ટોક્સોપ્લાઝ્મા-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમની ભૂમિકાની તપાસ કરવા માટે કોષ પ્રસારની તપાસ કરી.T. gondii-infected BV2 કોષોમાંથી એક્ઝોસોમ્સ સાથે U87 કોષોની સારવાર દર્શાવે છે કે T. gondii-infected BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સ નિયંત્રણની સરખામણીમાં U87 કોશિકાઓના નોંધપાત્ર રીતે ઊંચા પ્રસારનું કારણ બને છે (ફિગ. 2B).
વધુમાં, U118 કોષોના વિકાસના પરિણામો U87 જેવા જ હતા, કારણ કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા ઉત્તેજિત એક્ઝોસોમ ઉચ્ચતમ સ્તરના પ્રસારનું કારણ બને છે (ડેટા બતાવ્યા નથી).આ ડેટાના આધારે, અમે સૂચવી શકીએ છીએ કે BV2-પ્રાપ્ત ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત એક્ઝોસોમ્સ ગ્લિઓમા સેલ પ્રસારમાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે.
ગાંઠના વિકાસ પર ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ્સની અસરની તપાસ કરવા માટે, અમે ઝેનોગ્રાફ્ટ મોડલ માટે U87 ગ્લિઓમા કોષોને નગ્ન ઉંદરમાં ઇન્જેક્ટ કર્યા અને BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સ અથવા RH-સંક્રમિત BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ્સ ઇન્જેક્ટ કર્યા.1 અઠવાડિયા પછી ગાંઠો સ્પષ્ટ થયા પછી, 5 ઉંદરના દરેક પ્રાયોગિક જૂથને સમાન પ્રારંભિક બિંદુ નક્કી કરવા માટે ગાંઠના કદ અનુસાર વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા, અને ગાંઠનું કદ 22 દિવસ માટે માપવામાં આવ્યું હતું.
U87 xenograft મોડલ સાથેના ઉંદરોમાં, 22મા દિવસે (ફિગ. 3A,B) BV2-પ્રાપ્ત RH-સંક્રમિત એક્ઝોસોમ જૂથમાં નોંધપાત્ર રીતે મોટી ગાંઠનું કદ અને વજન જોવા મળ્યું હતું.બીજી બાજુ, BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસમ જૂથ અને એક્ઝોસમ સારવાર પછી નિયંત્રણ જૂથ વચ્ચે ગાંઠના કદમાં કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત નહોતો.વધુમાં, ગ્લિઓમા કોશિકાઓ અને એક્ઝોસોમ્સ સાથે ઇન્જેક્ટ કરાયેલા ઉંદરોએ RH-સંક્રમિત BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સ (ફિગ. 3C) ના જૂથમાં દૃષ્ટિની સૌથી મોટી ગાંઠનું પ્રમાણ દર્શાવ્યું હતું.આ પરિણામો દર્શાવે છે કે BV2-પ્રાપ્ત ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત એક્ઝોસોમ્સ માઉસ ટ્યુમર મોડેલમાં ગ્લિઓમા વૃદ્ધિને પ્રેરિત કરે છે.
U87 xenograft માઉસ મોડેલમાં BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમનું ઓન્કોજેનેસિસ (AC).ગાંઠનું કદ (A) અને વજન (B) નોંધપાત્ર રીતે BALB/c નગ્ન ઉંદરમાં BV2 માંથી મેળવેલા RH- સંક્રમિત એક્ઝોસોમ સાથે સારવાર કરવામાં આવ્યા હતા.BALB/c નગ્ન ઉંદર (C) ને મેટ્રિગેલ મિશ્રણમાં સ્થગિત 1 x 107 U87 કોષો સાથે સબક્યુટેનીયસ ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા.ઈન્જેક્શનના છ દિવસ પછી, ઉંદરમાં 100 μg BV2-પ્રાપ્ત એક્સોસોમની સારવાર કરવામાં આવી હતી.ગાંઠનું કદ અને વજન અનુક્રમે સૂચવેલા દિવસોમાં અને બલિદાન પછી માપવામાં આવ્યું હતું. *P <0.05. *P <0.05. *આર <0,05. *P <0.05. *પી <0.05. *પી <0.05. *આર <0,05. *P <0.05.
ડેટા દર્શાવે છે કે 37 miRNAs (16 ઓવરએક્સપ્રેસ્ડ અને 21 ડાઉન એક્સપ્રેસ્ડ) રોગપ્રતિકારક શક્તિ અથવા ગાંઠના વિકાસ સાથે સંકળાયેલા ટોક્સોપ્લાઝ્મા RH સ્ટ્રેન (ફિગ. 4A) ના ચેપ પછી માઇક્રોગ્લિયામાં નોંધપાત્ર રીતે બદલાયા હતા.બદલાયેલ miRNAs વચ્ચે miR-21 ના ​​સાપેક્ષ અભિવ્યક્તિ સ્તર BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સમાં, BV2 અને U87 કોષો સાથે સારવાર કરાયેલ એક્ઝોસોમ્સમાં રીઅલ-ટાઇમ RT-PCR દ્વારા પુષ્ટિ કરવામાં આવી હતી.miR-21 ની અભિવ્યક્તિએ ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી (આરએચ સ્ટ્રેન) (ફિગ. 4B) થી ચેપગ્રસ્ત BV2 કોષોમાંથી એક્ઝોસોમ્સમાં નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવ્યો હતો.BV2 અને U87 કોષોમાં miR-21 ના ​​સાપેક્ષ અભિવ્યક્તિનું સ્તર બદલાયેલ એક્ઝોસોમ (ફિગ. 4B) ના ઉપાડ પછી વધ્યું.ટ્યુમરના દર્દીઓ અને ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી (ME49 સ્ટ્રેઈન) થી સંક્રમિત ઉંદરોના મગજની પેશીઓમાં miR-21 અભિવ્યક્તિના સંબંધિત સ્તર અનુક્રમે નિયંત્રણ કરતા વધારે હતા (ફિગ. 4C).આ પરિણામો વિટ્રો અને વિવોમાં અનુમાનિત અને પુષ્ટિ થયેલ માઇક્રોઆરએનએના અભિવ્યક્તિ સ્તરો વચ્ચેના તફાવતો સાથે સંબંધ ધરાવે છે.
ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી (RH) થી સંક્રમિત માઇક્રોગ્લિયામાં એક્સોસોમલ miP-21a-5p ના અભિવ્યક્તિમાં ફેરફાર.(A) T. gondii RH ચેપ પછી રોગપ્રતિકારક શક્તિ અથવા ગાંઠના વિકાસ સાથે સંકળાયેલ siRNA માં નોંધપાત્ર ફેરફારો દર્શાવે છે.(B) સાપેક્ષ miR-21 અભિવ્યક્તિ સ્તરો BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમ્સ, BV2-સારવાર કરાયેલ એક્ઝોસોમ્સ અને U87 કોષોમાં રીઅલ-ટાઇમ RT-PCR દ્વારા શોધવામાં આવ્યા હતા.(C) ગાંઠના દર્દીઓ (N=3) અને ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી (ME49 સ્ટ્રેન) (N=3) થી સંક્રમિત ઉંદરોના મગજની પેશીઓમાં સંબંધિત miR-21 અભિવ્યક્તિ સ્તરો જોવા મળ્યા હતા. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P < 0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P < 0.05 通过学生t 检验获得. *P < 0.05 * પી <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * P < 0.05 વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને મેળવેલ.
આરએચ-સંક્રમિત BV2 કોષોમાંથી એક્ઝોસોમ્સ વિવો અને ઇન વિટ્રો (ફિગ. 2, 3) માં ગ્લિઓમાસની વૃદ્ધિ તરફ દોરી ગયા.સંબંધિત mRNAs શોધવા માટે, અમે BV2 અથવા RH BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમથી ચેપગ્રસ્ત U87 કોષોમાં એન્ટિટ્યુમર લક્ષ્ય જનીનો, ફોર્કહેડ બોક્સ O1 (FoxO1), PTEN અને પ્રોગ્રામ કરેલ સેલ ડેથ 4 (PDCD4) ના mRNA સ્તરોની તપાસ કરી.બાયોઇન્ફોર્મેટિક્સ વિશ્લેષણ દર્શાવે છે કે FoxO1, PTEN અને PDCD4 જનીનો સહિત અનેક ગાંઠ-સંબંધિત જનીનોમાં miR-2121,22 બંધનકર્તા સ્થળો છે.BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સ (ફિગ. 5A) ની તુલનામાં RH-સંક્રમિત BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સમાં એન્ટિટ્યુમર લક્ષ્ય જનીનોના mRNA સ્તરમાં ઘટાડો થયો હતો.FoxO1 એ BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ (આકૃતિ 5B) ની તુલનામાં RH-સંક્રમિત BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ્સમાં પ્રોટીન સ્તરમાં ઘટાડો દર્શાવ્યો હતો.આ પરિણામોના આધારે, અમે પુષ્ટિ કરી શકીએ છીએ કે RH- સંક્રમિત BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સ એન્ટી-ઓન્કોજેનિક જનીનોને નિયંત્રિત કરે છે, ગાંઠની વૃદ્ધિમાં તેમની ભૂમિકા જાળવી રાખે છે.
ટોક્સોપ્લાઝ્મા આરએચ-સંક્રમિત BV2-પ્રાપ્ત એક્સોસોમ્સ ટોક્સોપ્લાઝ્મા આરએચ-સંક્રમિત BV2-ઉત્પન્ન એક્ઝોસોમ્સ દ્વારા U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં એન્ટિટ્યુમર જનીનોને દબાવવા પ્રેરિત કરે છે.(A) PBS એક્ઝોસોમ્સની સરખામણીમાં T. gondii RH-infected BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમમાં FoxO1, PTEN અને PDCD4 અભિવ્યક્તિનું રીઅલ-ટાઇમ PCR.β-actin mRNA નો ઉપયોગ નિયંત્રણ તરીકે થતો હતો.(B) FoxO1 અભિવ્યક્તિ પશ્ચિમી બ્લોટિંગ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવી હતી અને ઇમેજજે પ્રોગ્રામનો ઉપયોગ કરીને ડેન્સિટોમેટ્રી ડેટાનું આંકડાકીય મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી ટેસ્ટ દ્વારા મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P < 0,05 было получено с помощью t-критерия Стьюдента. *P <0.05 વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને મેળવવામાં આવ્યો હતો. *P < 0.05 通过学生t 检验获得. *P < 0.05 * પી <0,05, полученный с помощью t-критерия Стьюдента. * P < 0.05 વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને મેળવેલ.
ટ્યુમર-સંબંધિત જનીન નિયમન પર એક્ઝોસોમ્સમાં miP-21 ની અસર સમજવા માટે, U87 કોષોને Lipofectamine 2000 નો ઉપયોગ કરીને miP-21 ના ​​અવરોધક સાથે ટ્રાન્સફેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા અને કોષો ટ્રાન્સફેક્શનના 24 કલાક પછી કાપવામાં આવ્યા હતા.miR-21 ઇન્હિબિટર્સથી ટ્રાન્સફેક્ટ થયેલા કોષોમાં FoxO1 અને p27 અભિવ્યક્તિ સ્તરની સરખામણી qRT-PCR (ફિગ. 6A,B) નો ઉપયોગ કરીને BV2-ઉત્પાદિત એક્સોસોમ સાથે સારવાર કરાયેલા કોષો સાથે કરવામાં આવી હતી.U87 કોષોમાં miR-21 અવરોધકનું ટ્રાન્સફેક્શન FoxO1 અને p27 અભિવ્યક્તિને નોંધપાત્ર રીતે ઘટાડે છે (FIG. 6).
RH-સંક્રમિત એક્ઝોસોમલ BV2-ઉત્પન્ન miP-21 એ U87 ગ્લિઓમા કોશિકાઓમાં FoxO1/p27 અભિવ્યક્તિમાં ફેરફાર કર્યો.Lipofectamine 2000 નો ઉપયોગ કરીને U87 કોષોને miP-21 અવરોધક વડે ટ્રાન્સફેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા અને ટ્રાન્સફેક્શનના 24 કલાક પછી કોષોની કાપણી કરવામાં આવી હતી.miR-21 અવરોધકો સાથે સ્થાનાંતરિત કોશિકાઓમાં FoxO1 અને p27 અભિવ્યક્તિ સ્તરની સરખામણી qRT-PCR (A, B) નો ઉપયોગ કરીને BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ સાથે સારવાર કરાયેલા કોષોના સ્તરો સાથે કરવામાં આવી હતી.
યજમાનના રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવથી બચવા માટે, ટોક્સોપ્લાઝ્મા પરોપજીવી પેશીના ફોલ્લોમાં પરિવર્તિત થાય છે.તેઓ યજમાનના સમગ્ર જીવનકાળ દરમિયાન મગજ, હૃદય અને હાડપિંજરના સ્નાયુ સહિત વિવિધ પેશીઓને પરોપજીવી બનાવે છે અને યજમાનના રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવને મોડ્યુલેટ કરે છે.વધુમાં, તેઓ કોષ ચક્ર અને યજમાન કોશિકાઓના એપોપ્ટોસિસને નિયંત્રિત કરી શકે છે, તેમના પ્રસારને પ્રોત્સાહન આપી શકે છે 14,24.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી મુખ્યત્વે યજમાન ડેંડ્રિટિક કોષો, ન્યુટ્રોફિલ્સ અને મોનોસાઇટ/મેક્રોફેજ વંશને ચેપ લગાડે છે, જેમાં મગજના માઇક્રોગ્લિયાનો સમાવેશ થાય છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી M2 ફેનોટાઇપના મેક્રોફેજના તફાવતને પ્રેરિત કરે છે, પેથોજેન ચેપ પછી ઘાના ઉપચારને અસર કરે છે, અને તે હાયપરવાસ્ક્યુલરાઇઝેશન અને ગ્રાન્યુલોમેટસ ફાઇબ્રોસિસ સાથે પણ સંકળાયેલ છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપના આ વર્તણૂકીય પેથોજેનેસિસ ગાંઠના વિકાસ સાથે સંકળાયેલા માર્કર્સ સાથે સંબંધિત હોઈ શકે છે.ટોક્સોપ્લાઝ્મા દ્વારા નિયંત્રિત પ્રતિકૂળ વાતાવરણ અનુરૂપ પૂર્વ-કેન્સર જેવું હોઈ શકે છે.તેથી, એવું માની શકાય છે કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ મગજની ગાંઠોના વિકાસમાં ફાળો આપવો જોઈએ.હકીકતમાં, વિવિધ મગજની ગાંઠો ધરાવતા દર્દીઓના સીરમમાં ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપના ઊંચા દરો નોંધાયા છે.વધુમાં, ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી અન્ય કાર્સિનોજેનિક અસરકર્તા હોઈ શકે છે અને અન્ય ચેપી કાર્સિનોજેન્સને મગજની ગાંઠો વિકસાવવામાં મદદ કરવા માટે સિનર્જિસ્ટિક રીતે કાર્ય કરે છે.આ સંદર્ભમાં, એ નોંધવું યોગ્ય છે કે પી. ફાલ્સીપેરમ અને એપ્સટિન-બાર વાયરસ સિનર્જિસ્ટિક રીતે બર્કિટના લિમ્ફોમાની રચનામાં ફાળો આપે છે.
કેન્સર સંશોધનના ક્ષેત્રમાં નિયમનકાર તરીકે એક્સોસોમની ભૂમિકાની વ્યાપક તપાસ કરવામાં આવી છે.જો કે, પરોપજીવીઓ અને ચેપગ્રસ્ત યજમાનો વચ્ચેના એક્ઝોસોમની ભૂમિકા નબળી રીતે સમજી શકાતી નથી.અત્યાર સુધી, સ્ત્રાવિત પ્રોટીન સહિત વિવિધ નિયમનકારોએ જૈવિક પ્રક્રિયાઓ સમજાવી છે જેના દ્વારા પ્રોટોઝોઆ પરોપજીવી યજમાનના હુમલાનો પ્રતિકાર કરે છે અને ચેપને કાયમી બનાવે છે.તાજેતરમાં, એવી વિભાવના વધી રહી છે કે પ્રોટોઝોઆન-સંબંધિત માઇક્રોવેસિકલ્સ અને તેમના માઇક્રોઆરએનએ તેમના અસ્તિત્વ માટે અનુકૂળ વાતાવરણ બનાવવા માટે યજમાન કોષો સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે.તેથી, બદલાયેલ એક્ઝોસોમલ miRNAs અને ગ્લિઓમા સેલ પ્રસાર વચ્ચેના સંબંધને શોધવા માટે વધુ અભ્યાસની જરૂર છે.માઇક્રોઆરએનએ ફેરફાર (ક્લસ્ટર જનીનો miR-30c-1, miR-125b-2, miR-23b-27b-24-1 અને miR-17-92) ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત માનવ મેક્રોફેજમાં STAT3 પ્રમોટર સાથે જોડાય છે, નિયમન થાય છે અને વિરોધી પ્રેરિત કરે છે. ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી ચેપના પ્રતિભાવમાં એપોપ્ટોસિસ 29.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ miR-17-5p અને miR-106b-5p ની અભિવ્યક્તિમાં વધારો કરે છે, જે ઘણા હાયપરપ્રોલિફેરેટિવ રોગો 30 સાથે સંકળાયેલા છે.આ ડેટા સૂચવે છે કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ દ્વારા નિયંત્રિત યજમાન miRNA એ યજમાન જૈવિક વર્તનમાં પરોપજીવી અસ્તિત્વ અને પેથોજેનેસિસ માટે મહત્વપૂર્ણ પરમાણુઓ છે.
બદલાયેલ miRNAs જીવલેણ કોષોની શરૂઆત અને પ્રગતિ દરમિયાન વિવિધ પ્રકારના વર્તનને પ્રભાવિત કરી શકે છે, જેમાં ગ્લિઓમાસનો સમાવેશ થાય છે: વૃદ્ધિ સંકેતોની સ્વ-પર્યાપ્તતા, વૃદ્ધિ-નિરોધક સંકેતો પ્રત્યે અસંવેદનશીલતા, એપોપ્ટોસીસ ચોરી, અમર્યાદિત પ્રતિકૃતિ સંભવિત, એન્જીયોજેનેસિસ, આક્રમણ અને મેટાસ્ટેસિસ, અને ઇન્ફ્લેમમ.ગ્લિઓમામાં, બદલાયેલ miRNAsની ઓળખ અનેક અભિવ્યક્તિ પ્રોફાઇલિંગ અભ્યાસોમાં કરવામાં આવી છે.
વર્તમાન અભ્યાસમાં, અમે ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત યજમાન કોષોમાં miRNA-21 અભિવ્યક્તિના ઉચ્ચ સ્તરની પુષ્ટિ કરી છે.miR-21 ને ગ્લિઓમાસ, 33 સહિત, ઘન ગાંઠોમાં સૌથી વધુ વારંવારના અતિશય પ્રભાવિત માઇક્રોઆરએનએ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે અને તેની અભિવ્યક્તિ ગ્લિઓમાના ગ્રેડ સાથે સંબંધ ધરાવે છે.સંચિત પુરાવા સૂચવે છે કે miR-21 એ એક નવલકથા ઓન્કોજીન છે જે ગ્લિઓમા વૃદ્ધિમાં એન્ટિ-એપોપ્ટોટિક પરિબળ તરીકે કામ કરે છે અને માનવ મગજની દૂષિતતાના પેશીઓ અને પ્લાઝ્મામાં ખૂબ જ વધારે પડતું હોય છે.રસપ્રદ વાત એ છે કે, ગ્લિઓમા કોશિકાઓ અને પેશીઓમાં miR-21 નિષ્ક્રિયતા કેસ્પેસ-આધારિત એપોપ્ટોસિસને કારણે કોષોના પ્રસારને અવરોધે છે.miR-21 અનુમાનિત લક્ષ્યોના બાયોઇન્ફોર્મેટીક પૃથ્થકરણમાં એપોપ્ટોસિસ પાથવે સાથે સંકળાયેલા બહુવિધ ટ્યુમર સપ્રેસર જનીનો બહાર આવ્યા છે, જેમાં એમઆઇઆર-2121 બંધનકર્તા સાઇટ સાથે પ્રોગ્રામ કરેલ સેલ ડેથ 4 (PDCD4), ટ્રોપોમાયોસિન (TPM1), PTEN અને ફોર્કહેડ બોક્સ O1 (FoxO1)નો સમાવેશ થાય છે..22.38.
FoxO1, ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળોમાંના એક (FoxO) તરીકે, વિવિધ પ્રકારના માનવ કેન્સરના વિકાસમાં સામેલ છે અને p21, p27, Bim અને FasL40 જેવા ટ્યુમર સપ્રેસર જનીનોની અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરી શકે છે.FoxO1 કોષની વૃદ્ધિને દબાવવા માટે p27 જેવા સેલ ચક્ર અવરોધકોને બાંધી અને સક્રિય કરી શકે છે.વધુમાં, FoxO1 એ PI3K/Akt સિગ્નલિંગનું મુખ્ય પ્રભાવક છે અને p2742 ટ્રાન્સક્રિપ્શનના સક્રિયકરણ દ્વારા સેલ સાયકલ પ્રોગ્રેસન અને સેલ ડિફરન્સિએશન જેવી ઘણી જૈવિક પ્રક્રિયાઓનું નિયમન કરે છે.
નિષ્કર્ષમાં, અમે માનીએ છીએ કે ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત માઇક્રોગ્લિયામાંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમલ miR-21 ગ્લિઓમા કોશિકાઓના વૃદ્ધિ નિયમનકાર તરીકે મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવી શકે છે (ફિગ. 7).જો કે, એક્સોસોમલ miR-21, બદલાયેલ ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ અને ગ્લિઓમા વૃદ્ધિ વચ્ચે સીધો સંબંધ શોધવા માટે વધુ અભ્યાસની જરૂર છે.આ પરિણામો ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ અને ગ્લિઓમાની ઘટનાઓ વચ્ચેના સંબંધનો અભ્યાસ કરવા માટે પ્રારંભિક બિંદુ પ્રદાન કરશે તેવી અપેક્ષા છે.
આ અભ્યાસમાં ગ્લિઓમા (મગજ) કાર્સિનોજેનેસિસની પદ્ધતિનો એક યોજનાકીય રેખાકૃતિ પ્રસ્તાવિત છે.લેખક PowerPoint 2019 (Microsoft, Redmond, WA) માં દોરે છે.
આ અભ્યાસમાં તમામ પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલ, જેમાં પ્રાણીઓના ઉપયોગનો સમાવેશ થાય છે, સિઓલ નેશનલ યુનિવર્સિટી એનિમલ કેર એન્ડ યુઝર કમિટી સ્ટાન્ડર્ડ એથિકલ ગાઈડલાઈન્સ અનુસાર હતા અને સિઓલ નેશનલ યુનિવર્સિટી સ્કૂલ ઓફ મેડિસિન (IRB નંબર SNU-) ના સંસ્થાકીય સમીક્ષા બોર્ડ દ્વારા મંજૂર કરવામાં આવ્યા હતા. 150715).-2).તમામ પ્રાયોગિક પ્રક્રિયાઓ ARRIVE ભલામણો અનુસાર હાથ ધરવામાં આવી હતી.
BV2 માઉસ માઇક્રોગ્લિયા અને U87 માનવ ગ્લિઓમા કોષોને ડુલ્બેકોના મોડિફાઇડ ઇગલના માધ્યમ (DMEM; વેલ્જેન, સિઓલ, કોરિયા) અને રોઝવેલ પાર્ક મેમોરિયલ ઇન્સ્ટિટ્યૂટના માધ્યમ (RPMI; વેલ્જેન) માં અનુક્રમે સંવર્ધિત કરવામાં આવ્યા હતા, દરેકમાં 10% ગર્ભ બોવાઇન સીરમ, m4-4. ગ્લુટામાઇન, 0.2 એમએમ પેનિસિલિન અને 0.05 એમએમ સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન.37°C તાપમાને 5% CO2 સાથે ઇન્ક્યુબેટરમાં કોષોનું સંવર્ધન કરવામાં આવ્યું હતું.અન્ય ગ્લિઓમા સેલ લાઇન, U118 નો ઉપયોગ U87 કોષો સાથે સરખામણી કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો.
T. gondii-infected RH અને ME49 સ્ટ્રેન્સમાંથી એક્ઝોસોમ્સને અલગ કરવા માટે, T. gondii tachyzoites (RH સ્ટ્રેઇન) 3-4 દિવસ પહેલાં ઇન્જેક્ટ કરાયેલા 6-અઠવાડિયાના BALB/c ઉંદરના પેટની પોલાણમાંથી કાપવામાં આવ્યા હતા.Tachyzoites PBS સાથે ત્રણ વખત ધોવાયા હતા અને 40% પરકોલમાં સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા શુદ્ધ કરવામાં આવ્યા હતા.તાણ ME49 ના ટાકીઝોઇટ મેળવવા માટે, BALB/c ઉંદરને 20 પેશી કોથળીઓ સાથે ઇન્ટ્રાપેરીટોનલી ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા અને ચેપ (PI) પછી 6-8મા દિવસે પેટની પોલાણને ધોઈને કોથળીઓમાં ટાકીઝોઇટ રૂપાંતરણ એકત્રિત કરવામાં આવ્યું હતું.PBS થી ચેપગ્રસ્ત ઉંદર.ME49 tachyzoites 100 μg/ml પેનિસિલિન (Gibco/BRL, Grand Island, NY, USA), 100 μg/ml streptomycin (Gibco/BRL), અને 5% ફેટલ બોવાઇન સીરમ (લોન્ઝા, વોકર્સવિલે, MD) સાથે પૂરક કોષોમાં ઉગાડવામાં આવ્યા હતા. .., USA) 37 °C અને 5% કાર્બન ડાયોક્સાઇડ પર.વેરો કોશિકાઓમાં ખેતી કર્યા પછી, ME49 ટાકીઝોઇટ્સને 25 ગેજની સોય દ્વારા અને પછી કાટમાળ અને કોષોને દૂર કરવા માટે 5 µm ફિલ્ટર દ્વારા બે વાર પસાર કરવામાં આવ્યા હતા.ધોવા પછી, ટાકીઝોઇટ્સ PBS44 માં ફરીથી સસ્પેન્ડ કરવામાં આવ્યા હતા.ટોક્સોપ્લાઝ્મા ગોન્ડી સ્ટ્રેન ME49 ના પેશી કોથળીઓને ચેપગ્રસ્ત C57BL/6 ઉંદર (ઓરિએન્ટ બાયો એનિમલ સેન્ટર, સિઓન્ગ્નામ, કોરિયા) ના મગજમાંથી અલગ કરાયેલા કોથળીઓના ઇન્ટ્રાપેરીટોનિયલ ઇન્જેક્શન દ્વારા જાળવવામાં આવી હતી.ME49-સંક્રમિત ઉંદરોના મગજ PI ના 3 મહિના પછી કાપવામાં આવ્યા હતા અને કોથળીઓને અલગ કરવા માટે માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ નાજુકાઈ કરવામાં આવ્યા હતા.ચેપગ્રસ્ત ઉંદરોને સિઓલ નેશનલ યુનિવર્સિટી સ્કૂલ ઓફ મેડિસિન ખાતે વિશેષ રોગકારક-મુક્ત સ્થિતિ (SPF) હેઠળ રાખવામાં આવ્યા હતા.
ઉત્પાદકની સૂચનાઓ અનુસાર miRNeasy મીની કીટ (કિયાજેન, હિલ્ડન, જર્મની) નો ઉપયોગ કરીને BV2-ઉત્પાદિત એક્ઝોસોમ્સ, BV2 કોષો અને પેશીઓમાંથી કુલ RNA કાઢવામાં આવ્યું હતું, જેમાં ઉત્સર્જન પગલાં માટેના સેવન સમયનો સમાવેશ થાય છે.નેનોડ્રોપ 2000 સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટર પર આરએનએ સાંદ્રતા નક્કી કરવામાં આવી હતી.આરએનએ માઇક્રોએરેની ગુણવત્તાનું મૂલ્યાંકન એજિલેન્ટ 2100 બાયોએનાલાઇઝર (એજિલેન્ટ ટેક્નોલોજીસ, એમ્સ્ટેલવીન, નેધરલેન્ડ) નો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યું હતું.
10% એક્ઝોસોમ-ગરીબ FBS સાથેનું DMEM અલ્ટ્રાસેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા 100,000g પર 16 કલાક માટે 4°C પર તૈયાર કરવામાં આવ્યું હતું અને 0.22 µm ફિલ્ટર (નાલ્જેન, રોચેસ્ટર, NY, USA) દ્વારા ફિલ્ટર કરવામાં આવ્યું હતું.BV2 કોષો, 5 × 105, DMEM માં સંવર્ધિત કરવામાં આવ્યા હતા જેમાં 10% એક્ઝોસોમ-ક્ષીણ FBS અને 1% એન્ટિબાયોટિક્સ 37°C અને 5% CO2 હતા.ઇન્ક્યુબેશનના 24 કલાક પછી, સ્ટ્રેઈન RH અથવા ME49 (MOI = 10) ના ટાચીઝોઈટ્સ કોષોમાં ઉમેરવામાં આવ્યા હતા અને બિન-આક્રમક પરોપજીવીઓને એક કલાકની અંદર દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને DMEM સાથે રિફિલ કરવામાં આવ્યા હતા.BV2 કોષોમાંથી એક્ઝોસોમને સંશોધિત વિભેદક સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા અલગ કરવામાં આવ્યા હતા, જે સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ છે.RNA અથવા પ્રોટીન પૃથ્થકરણ માટે 300 μl PBS માં એક્ઝોસમ પેલેટને ફરીથી સસ્પેન્ડ કરો.બીસીએ પ્રોટીન એસે કીટ (પિયર્સ, રોકફોર્ડ, આઈએલ, યુએસએ) અને નેનોડ્રોપ 2000 સ્પેક્ટ્રોફોટોમીટરનો ઉપયોગ કરીને અલગ થયેલ એક્ઝોસોમની સાંદ્રતા નક્કી કરવામાં આવી હતી.
BV2 કોષો અથવા BV2 માંથી મેળવેલા એક્ઝોસોમ્સ PRO-PREP™ પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ સોલ્યુશન (iNtRon બાયોટેક્નોલોજી, સિઓન્ગ્નામ, કોરિયા) માં નાખવામાં આવ્યા હતા અને પ્રોટીનને Coomassie બ્રિલિયન્ટ બ્લુ સ્ટેઇન્ડ 10% SDS પોલિઆક્રાયલામાઇડ જેલ્સ પર લોડ કરવામાં આવ્યા હતા.વધુમાં, પ્રોટીનને 2 કલાક માટે PVDF પટલમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા.એક્ઝોસોમલ માર્કર તરીકે એલિક્સ એન્ટિબોડી (સેલ સિગ્નલિંગ ટેક્નોલોજી, બેવર્લી, એમએ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને પશ્ચિમી બ્લોટ્સને માન્ય કરવામાં આવ્યા હતા.HRP-સંયોજિત બકરી વિરોધી માઉસ IgG (H + L) (બેથિલ લેબોરેટરીઝ, મોન્ટગોમરી, TX, USA) અને LAS-1000 પ્લસ લ્યુમિનેસેન્ટ ઇમેજ વિશ્લેષક (ફુજી ફોટોગ્રાફિક ફિલ્મ, ટોક્યો, જાપાન) નો ઉપયોગ ગૌણ એન્ટિબોડી તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો..એક્સોસોમના કદ અને આકારશાસ્ત્રનો અભ્યાસ કરવા ટ્રાન્સમિશન ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી કરવામાં આવી હતી.BV2 કોષો (6.40 µg/µl) માંથી અલગ કરાયેલા એક્ઝોસોમ્સ કાર્બન-કોટેડ મેશ પર તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા અને 1 મિનિટ માટે 2% યુરેનાઈલ એસીટેટથી નકારાત્મક રીતે સ્ટેઇન્ડ કરવામાં આવ્યા હતા.ES1000W Erlangshen CCD કેમેરા (Gatan, Pleasanton, CA, USA) થી સજ્જ JEOL 1200-EX II (ટોક્યો, જાપાન) નો ઉપયોગ કરીને તૈયાર નમૂનાઓ 80 kV ના પ્રવેગક વોલ્ટેજ પર જોવામાં આવ્યા હતા.
PKH26 રેડ ફ્લોરોસન્ટ લિન્કર કિટ (સિગ્મા-એલ્ડ્રિચ, સેન્ટ. લૂઈસ, એમઓ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને ઓરડાના તાપમાને 15 મિનિટ માટે BV2-પ્રાપ્ત એક્ઝોસોમને ડાઘ કરવામાં આવ્યા હતા.U87 કોષો, 2×105, PKH26-લેબલવાળા એક્ઝોસોમ્સ (લાલ) સાથે અથવા નકારાત્મક નિયંત્રણ તરીકે કોઈ એક્ઝોસોમ નથી, 5% CO2 ઇન્ક્યુબેટરમાં 24 કલાક માટે 37°C તાપમાને ઉકાળવામાં આવ્યા હતા.U87 સેલ ન્યુક્લીને DAPI (વાદળી) થી રંગવામાં આવ્યા હતા, U87 કોષોને 4% પેરાફોર્મલ્ડીહાઈડમાં 15 મિનિટ માટે 4°C પર નિશ્ચિત કરવામાં આવ્યા હતા અને પછી Leica TCS SP8 STED CW કોન્ફોકલ માઈક્રોસ્કોપ સિસ્ટમ (Leica Microsystems, Mannheim, Germany) માં વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.અવલોકનક્ષમ
Mir-X siRNA ફર્સ્ટ સ્ટ્રૅન્ડ સિન્થેસિસ અને SYBR qRT-PCR કિટ (Takara Bio Inc., Shiga, Japan) નો ઉપયોગ કરીને siRNA માંથી cDNA નું સંશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.SYBR પ્રિમિક્સ સાથે મિશ્રિત પ્રાઇમર્સ અને ટેમ્પ્લેટ્સનો ઉપયોગ કરીને iQ5 રીઅલ ટાઇમ પીસીઆર ડિટેક્શન સિસ્ટમ (બાયો-રેડ, હર્ક્યુલસ, સીએ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને રીઅલ ટાઇમ જથ્થાત્મક પીસીઆર કરવામાં આવ્યું હતું.ડીએનએ વિકૃતીકરણના 40 ચક્રો માટે 95 ° સે પર 15 સે અને 60 s માટે 60 ° સે પર એનિલિંગ માટે વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યું હતું.iQ™5 ઓપ્ટિકલ સિસ્ટમ સોફ્ટવેર (બાયો-રેડ) ના ડેટા વિશ્લેષણ મોડ્યુલનો ઉપયોગ કરીને દરેક પીસીઆર પ્રતિક્રિયામાંથી ડેટાનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું.પસંદ કરેલા લક્ષ્ય જનીનો અને β-actin/siRNA (અને U6) વચ્ચેના જનીન અભિવ્યક્તિમાં સંબંધિત ફેરફારોની ગણતરી પ્રમાણભૂત વળાંક પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવી હતી.વપરાયેલ પ્રાઈમર સિક્વન્સ કોષ્ટક 1 માં દર્શાવવામાં આવ્યા છે.
3 x 104 U87 ગ્લિઓમા કોષોને 96-વેલ પ્લેટમાં સીડ કરવામાં આવ્યા હતા અને BV2 (50 μg/mL) માંથી તારવેલા ટોક્સોપ્લાઝ્મા-સંક્રમિત એક્સોસોમ્સ અથવા BV2 (50 μg/mL) માંથી તારવેલા નોનપલ્સ એક્સોસોમ્સ સાથે 12, 18 અને 13 કલાકના નિયંત્રણો તરીકે મિશ્રિત કરવામાં આવ્યા હતા. .સેલ કાઉન્ટિંગ કિટ-8 (ડોજિન્ડો, કુમામોટો, જાપાન) (પૂરક આંકડા S1-S3) 46 નો ઉપયોગ કરીને સેલ પ્રસારનો દર નક્કી કરવામાં આવ્યો હતો.
5-અઠવાડિયાની માદા BALB/c નગ્ન ઉંદરને ઓરિએન્ટ બાયો (સેઓન્ગ્નામ-સી, દક્ષિણ કોરિયા) પાસેથી ખરીદવામાં આવી હતી અને ઓરડાના તાપમાને (22±2°C) અને ભેજ (45±15°C) પર વ્યક્તિગત રીતે જંતુરહિત પાંજરામાં રાખવામાં આવી હતી.%) ઓરડાના તાપમાને (22±2°C) અને ભેજ (45±15%).SPF (સિઓલ નેશનલ યુનિવર્સિટી સ્કૂલ ઓફ મેડિસિન એનિમલ સેન્ટર) હેઠળ 12-કલાકની લાઇટ સાઇકલ અને 12-કલાકની ડાર્ક સાઇકલ કરવામાં આવી હતી.ઉંદરોને અવ્યવસ્થિત રીતે 5 ઉંદરના ત્રણ જૂથોમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા અને તમામ જૂથોને 1 x 107 U87 ગ્લિઓમા કોષો ધરાવતા 400 મિલી પીબીએસ સાથે સબક્યુટેનીયસ ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા અને વૃદ્ધિ પરિબળ BD Matrigel™ (BD Science, Miami, FL, USA) ઘટાડે છે.ગાંઠના ઇન્જેક્શનના છ દિવસ પછી, BV2 કોષોમાંથી મેળવેલા 200 મિલિગ્રામ એક્ઝોસોમ (ટોક્સોપ્લાઝ્મા ચેપ સાથે/વિના) ટ્યુમર સાઇટમાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા.ગાંઠના ચેપના બાવીસ દિવસ પછી, દરેક જૂથમાં ઉંદરની ગાંઠનું કદ અઠવાડિયામાં ત્રણ વખત કેલિપર વડે માપવામાં આવ્યું હતું, અને ગાંઠની માત્રા સૂત્ર દ્વારા ગણવામાં આવી હતી: 0.5×(પહોળાઈ)×2×લંબાઈ.
miRCURYTM LNA miRNA એરેનો ઉપયોગ કરીને માઇક્રોઆરએનએ અભિવ્યક્તિ વિશ્લેષણ, 7મી પેઢી ધરાવે છે, mmu અને rno એરે (EXIQON, Vedbaek, ડેનમાર્ક) 3100 માનવ, માઉસ અને ઉંદર miRNA કેપ્ચર પ્રોબ્સમાં 1119 સારી લાક્ષણિકતાવાળા ઉંદરોને આવરી લે છે.આ પ્રક્રિયા દરમિયાન, વાછરડાના આંતરડાના આલ્કલાઇન ફોસ્ફેટ સાથેની સારવાર દ્વારા 5′-ફોસ્ફેટમાંથી કુલ RNA માંથી 250 થી 1000 ng દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને ત્યારબાદ Hy3 ગ્રીન ફ્લોરોસન્ટ ડાય સાથે લેબલિંગ કરવામાં આવ્યું હતું.લેબલવાળા નમૂનાઓ પછી હાઇબ્રિડાઇઝેશન ચેમ્બર કીટ (એજિલેન્ટ ટેક્નોલોજી, સાન્ટા ક્લેરા, CA, યુએસએ) અને હાઇબ્રિડાઇઝેશન સ્લાઇડ કીટ (એજિલેન્ટ ટેક્નોલોજીસ) નો ઉપયોગ કરીને માઇક્રોએરે સ્લાઇડ્સ લોડ કરીને હાઇબ્રિડાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા.હાઇબ્રિડાઇઝેશન 16 કલાક માટે 56 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર હાથ ધરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ ઉત્પાદકની ભલામણો અનુસાર માઇક્રોએરે ધોવાઇ ગયા હતા.પ્રક્રિયા કરેલ માઇક્રોએરે સ્લાઇડ્સને પછી એજિલેન્ટ G2565CA માઇક્રોએરે સ્કેનર સિસ્ટમ (એજિલેન્ટ ટેક્નોલોજીસ) નો ઉપયોગ કરીને સ્કેન કરવામાં આવી હતી.સ્કેન કરેલી ઈમેજો એજિલેન્ટ ફીચર એક્સટ્રેક્શન સોફ્ટવેર વર્ઝન 10.7.3.1 (એજીલેન્ટ ટેક્નોલોજીસ) નો ઉપયોગ કરીને આયાત કરવામાં આવી હતી અને દરેક ઈમેજની ફ્લોરોસેન્સ ઇન્ટેન્સિટી સંશોધિત એક્ઝિકોન પ્રોટોકોલની અનુરૂપ GAL ફાઇલનો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવી હતી.વર્તમાન અભ્યાસ માટેનો માઈક્રોએરે ડેટા એસેસન નંબર GPL32397 હેઠળ GEO ડેટાબેઝમાં જમા કરવામાં આવે છે.
ટોક્સોપ્લાઝ્માથી સંક્રમિત RH અથવા ME49 સ્ટ્રેઈનના માઇક્રોગ્લિયામાં પરિપક્વ એક્ઝોસોમલ miRNAs ની અભિવ્યક્તિ પ્રોફાઇલ્સનું વિશ્લેષણ વિવિધ નેટવર્ક સાધનોનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યું હતું.ટ્યુમર ડેવલપમેન્ટ સાથે સંકળાયેલ miRNAs ને miRWalk2.0 (http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de) નો ઉપયોગ કરીને ઓળખવામાં આવ્યા હતા અને 8.0 કરતા વધુ સામાન્ય સિગ્નલ ઇન્ટેન્સિટી (log2) સાથે ફિલ્ટર આઉટ કરવામાં આવ્યા હતા.miRNAsમાં, T. gondii થી ચેપગ્રસ્ત RH અથવા ME49 સ્ટ્રેઈન દ્વારા બદલાયેલ miRNAs ના ફિલ્ટર વિશ્લેષણ દ્વારા 1.5-ગણાથી વધુ બદલાયેલા miRNAsમાં ભિન્નતા દર્શાવવામાં આવી હતી.
Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) નો ઉપયોગ કરીને ઓપ્ટી-MEM (Gibco, Carlsbad, CA, USA) માં કોષોને છ-વેલ પ્લેટ્સ (3 x 105 સેલ/વેલ) માં સીડ કરવામાં આવ્યા હતા.ટ્રાન્સફેક્ટેડ કોષોને 6 કલાક સુધી સંવર્ધન કરવામાં આવ્યું હતું અને પછી માધ્યમને તાજા સંપૂર્ણ માધ્યમમાં બદલવામાં આવ્યું હતું.ટ્રાન્સફેક્શનના 24 કલાક પછી કોષોની કાપણી કરવામાં આવી હતી.
આંકડાકીય વિશ્લેષણ મુખ્યત્વે એક્સેલ સોફ્ટવેર (માઈક્રોસોફ્ટ, વોશિંગ્ટન, ડીસી, યુએસએ) સાથે વિદ્યાર્થીની ટી-ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યું હતું.પ્રાયોગિક પ્રાણી વિશ્લેષણ માટે, પ્રિઝમ 3.0 સોફ્ટવેર (ગ્રાફપેડ સોફ્ટવેર, લા જોલા, સીએ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને દ્વિ-માર્ગી ANOVA કરવામાં આવ્યું હતું. P-મૂલ્યો <0.05 ને આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર ગણવામાં આવ્યા હતા. P-મૂલ્યો <0.05 ને આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર ગણવામાં આવ્યા હતા. Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P મૂલ્યો <0.05 ને આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર ગણવામાં આવતા હતા. પી 值< 0.05 被认为具有统计学意义. પી 值< 0.05 Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P મૂલ્યો <0.05 ને આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર ગણવામાં આવતા હતા.
આ અભ્યાસમાં ઉપયોગમાં લેવાતા તમામ પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલને સિઓલ નેશનલ યુનિવર્સિટી સ્કૂલ ઓફ મેડિસિન (IRB નંબર SNU-150715-2)ના સંસ્થાકીય સમીક્ષા બોર્ડ દ્વારા મંજૂરી આપવામાં આવી હતી.
The data used in this study are available upon reasonable request from the first author (BK Jung; mulddang@snu.ac.kr). And the microarray data for the current study is deposited in the GEO database under registration number GPL32397.
ફર્લી, જે. એટ અલ.2018 માં અંદાજિત વૈશ્વિક કેન્સરની ઘટનાઓ અને મૃત્યુદર: GLOBOCAN સ્ત્રોતો અને પદ્ધતિઓ.અર્થઘટન.જે. રક 144, 1941–1953 (2019).
રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ મગજની ગાંઠોના જોખમી પરિબળો અને તેમના ઉપચારાત્મક હસ્તક્ષેપોની આંતરદૃષ્ટિ. રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ મગજની ગાંઠોના જોખમી પરિબળો અને તેમના ઉપચારાત્મક હસ્તક્ષેપોની આંતરદૃષ્ટિ.રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ મગજની ગાંઠો અને મુખ્ય ઉપચારાત્મક હસ્તક્ષેપ માટે જોખમી પરિબળોની સમીક્ષા. રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ 深入了解脑肿瘤的危险因素及其治疗干预措施. રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ મગજની ગાંઠના જોખમના પરિબળો અને ઉપચારાત્મક દરમિયાનગીરીઓની ઊંડી સમજ.રશીદ, એસ., રહેમાન, કે. અને આકાશ, એમએસ મગજની ગાંઠો અને મુખ્ય ઉપચારાત્મક હસ્તક્ષેપ માટે જોખમી પરિબળોની સમીક્ષા.બાયોમેડિકલ વિજ્ઞાન.ફાર્માસિસ્ટ.143, 112119 (2021).
કાટો, આઈ., ઝાંગ, જે. એન્ડ સન, જે. હ્યુમન ઓરોડિજેસ્ટિવ અને ફિમેલ જનનાંગ માર્ગના કેન્સરમાં બેક્ટેરિયલ-વાયરલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ: રોગચાળા અને પ્રયોગશાળાના પુરાવાઓનો સારાંશ. કાટો, આઈ., ઝાંગ, જે. એન્ડ સન, જે. હ્યુમન ઓરોડિજેસ્ટિવ અને ફિમેલ જનનાંગ માર્ગના કેન્સરમાં બેક્ટેરિયલ-વાયરલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ: રોગચાળા અને પ્રયોગશાળાના પુરાવાઓનો સારાંશ.કાટો આઈ., ઝાંગ જે. અને સન જે. માનવ જઠરાંત્રિય માર્ગ અને સ્ત્રી જનન માર્ગના કેન્સરમાં બેક્ટેરિયલ-વાયરલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ: રોગચાળા અને પ્રયોગશાળાના ડેટાનો સારાંશ. કાટો, આઇ., ઝાંગ, જે. એન્ડ સન, જે. 人类口腔消化道癌和女性生殖道癌中的细菌-病毒相中的细菌-病毒相互央咦茵黁夯夯审弚. કાટો, આઈ., ઝાંગ, જે. એન્ડ સન, જે. માનવ મૌખિક પોલાણ પાચન અને સ્ત્રી પ્રજનન માર્ગમાં બેક્ટેરિયો-વાયરલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: લોકપ્રિય રોગ વિજ્ઞાન અને પ્રયોગશાળા પુરાવાનો સારાંશ.કાટો આઈ., ઝાંગ જે. અને સન જે. માનવ જઠરાંત્રિય કેન્સર અને સ્ત્રી જનન કેન્સરમાં બેક્ટેરિયલ-વાયરલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: રોગચાળા અને પ્રયોગશાળાના ડેટાનો સારાંશ.કેન્સર 14, 425 (2022).
મેગોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ ચેપથી કેન્સર સુધી: કેવી રીતે ડીએનએ ટ્યુમર વાયરસ હોસ્ટ સેલ સેન્ટ્રલ કાર્બન અને લિપિડ મેટાબોલિઝમને બદલે છે. મેગોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ ચેપથી કેન્સર સુધી: કેવી રીતે ડીએનએ ટ્યુમર વાયરસ હોસ્ટ સેલ સેન્ટ્રલ કાર્બન અને લિપિડ મેટાબોલિઝમને બદલે છે.માહોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ ફાયર ઇન્ફેક્શન ટુ કેન્સર: કેવી રીતે ડીએનએ-આધારિત ટ્યુમર વાયરસ હોસ્ટ સેલ સેન્ટ્રલ કાર્બન અને લિપિડ મેટાબોલિઝમને બદલે છે. મેગોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ 从感染到癌症：DNA 肿瘤病毒如何改变宿主细胞的中心碳和脂质代谢. મેગોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ ચેપથી કેન્સર સુધી: કેવી રીતે ડીએનએ ટ્યુમર વાયરસ હોસ્ટ સેલ સેન્ટ્રલ કાર્બન અને લિપિડ મેટાબોલિઝમને બદલે છે.મહોન, કેએલ અને પેરિશ, જેએલ કેન્સરને ચેપ લગાડે છે: કેવી રીતે ડીએનએ ટ્યુમર વાયરસ યજમાન કોષોમાં કેન્દ્રીય કાર્બન અને લિપિડ ચયાપચયને બદલે છે.ઓપન બાયોલોજી.11, 210004 (2021).
કોરિયા દા કોસ્ટા, જેએમ એટ અલ.શિસ્ટોસોમ્સ અને લીવર ફ્લુક્સ અને હેલ્મિન્થ-સંબંધિત કેન્સરના કેટેકોલ એસ્ટ્રોજેન્સ.આગળ.અંદર ગરમ.5, 444 (2014).